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SDS-PAGE的主要用途,以及不同的凝膠濃 度在實際應(yīng)用中的意義。

作者:訪客發(fā)布時間:2021-08-18分類:塑料制品瀏覽:123


導(dǎo)讀:主要用于分離蛋白質(zhì)或者核酸,不同濃度的分辨率不一樣,比如一定高濃度的膠可以分離質(zhì)量分數(shù)為1000和1100的,而濃度降低后就難以實現(xiàn)1000與1100的分離。化學(xué)聚合以過硫酸銨(A...

主要用于分離蛋白質(zhì)或者核酸,不同濃度的分辨率不一樣,比如一定高濃度的膠可以分離質(zhì)量分數(shù)為1000和1100的,而濃度降低后就難以實現(xiàn)1000與1100的分離。
化學(xué)聚合以過硫酸銨(APS)為催化劑,以四甲基乙二胺(TEMED)為加速劑。在聚合過程中,TEMED催化過硫酸銨產(chǎn)生自由基,后者引發(fā)丙烯酰胺單體聚合,同時甲叉雙丙烯酰胺與丙烯酰胺鏈間產(chǎn)生甲叉鍵交聯(lián),從而形成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。



擴展資料:

在變性聚丙烯酰胺凝膠電泳中,由于加入了變性劑——蛋白質(zhì)變性劑常為SDS(SDS-PAGE),核酸變性劑常為尿素、甲酰胺等,故其分離僅依據(jù)于分子量大小。
發(fā)現(xiàn)在樣品介質(zhì)和丙烯酰胺凝膠中加入離子表面活性劑和強還原劑(SDS,即十二烷基硫酸鈉)后,蛋白質(zhì)亞基的電泳遷移率主要取決于亞基分子量的大小(可以忽略電荷因素)。SDS是陰離子去表面活性劑,作為變性劑和助溶試劑。
能斷裂分子內(nèi)和分子間的氫鍵,使分子去折疊,破壞蛋白分子的二、三級結(jié)構(gòu)。而強還原劑如巰基乙醇,二硫蘇糖醇能使半胱氨酸殘基間的二硫鍵斷裂。在樣品和凝膠中加入還原劑和SDS后,分子被解聚成多肽鏈。
參考資料來源:百度百科-SDS-PAGE

標簽:凝膠用途實際


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