1.wash buffer中加入無水乙醇后，終濃度差不多就是70%的乙醇溶液了，在沉淀的DNA中，由于過多的鹽雜質(zhì)存在，影響DNA的酶切等反應(yīng)，wash buffer就是洗去這些鹽雜質(zhì)的。
2.用無水乙醇沉淀DNA，這是實驗中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的優(yōu)點是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學(xué)反應(yīng)，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在，當(dāng)加入乙醇時，乙醇會奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般實驗中，是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混合，其乙醇的最終含量占67％左右。因而也可改用95％乙醇來替代無水乙醇（因為無水乙醇的價格遠遠比95％乙醇昂貴）。但是加95％的乙醇使總體積增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA損失也增大，尤其用多次乙醇沉淀時，就會影響收得率。折中的做法是初次沉淀DNA時可用95％乙醇代替無水乙酵，最后的沉淀步驟要使用無水乙醇。也可以用0.6倍體積的異丙醇選擇性沉淀DNA。一般在室溫下放置15－30分鐘即可。如果你沒有加無水乙醇，核酸不能沉淀，都隨洗液棄掉了。
3.十二烷基硫酸鈉（sodium dodecylsulfate）遇到鉀離子后變成了十二烷基硫酸鉀（potassium dodecylsulfate, PDS），鉀離子置換了SDS中的鈉離子形成了不溶性的PDS，而高濃度 的鹽，使得沉淀更完全。大家知道SDS專門喜歡和蛋白質(zhì)結(jié)合，平均兩個氨基酸上結(jié)合一個SDS分子，鉀鈉離子置換所產(chǎn)生的大量沉淀自然就將絕大部分蛋白質(zhì) 沉淀了，讓人高興的是大腸桿菌的基因組DNA也一起被共沉淀了。這個過程不難想象，因為基因組DNA太長了，長長的DNA自然容易被PDS給共沉淀了，盡管SDS并不與DNA分子結(jié)合。
需要特別說明的是：醋酸的加入是為了中和NaOH，因為長時間的堿性條件會打斷DNA，所以要中和之?；蚪MDNA一旦發(fā)生斷裂，只要是50－100 kb大小的片斷，就沒有辦法再被PDS共沉淀了。所以堿處理的時間要短，而且不得激烈振蕩，不然最后得到的質(zhì)粒上總會有大量的基因組DNA混入。

草莓種植技術(shù)

露地高產(chǎn)栽培技術(shù) 獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)，好效益的栽培技術(shù)要點 1、選好品種 豐香有耐熱、耐寒高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、口感好的特性，還比較耐貯藏和運輸。因此，該品種應(yīng)為百色種植的首選。其它品種，不論是新的、舊的，一定經(jīng)試種才能大面積種植。 值得注意的是，購苗時一定要把好質(zhì)量關(guān)。這個質(zhì)量有兩層意思。一層是選取壯苗，即根莖粗壯，無病蟲害，須根多，有4～6片葉，葉柄粗短，葉厚而大；另一層是要通過正規(guī)渠道購苗，訂立購苗協(xié)議，以防假冒偽劣。 2、選地和整地 （1）選地：排、灌方便、光照充足、土質(zhì)疏松、保水保肥力強的中、晚稻田最適宜。 (2)整地：兩犁兩耙后起畦，再放肥，也可直接起畦，并施基肥后將表土（20cm厚）打細碎。 具體要求： 施基肥—→農(nóng)家肥750公斤(如腐熟的豬牛雞糞草木灰等),磷肥50公斤促長根,復(fù)合肥12.5公斤,一起與表土打碎混勻。 起畦—→每壟寬1米連溝，壟高25～30cm，溝寬25cm，畦面40～50cm，做成梯形。（畫一個簡圖） 3、種植 （1）時間：氣溫在30°C以下，地溫17°左右可定植，廣西大部分地方以10月為最佳時間。也可參考以新年為采果期，倒推50天作為種植期，即10月上旬。有遮陽網(wǎng)的農(nóng)戶，可在9月底遮陰種植，可提前收果上市，搶好價錢。 （2）種法：單畦雙行，株行距25×25厘米，畝需6000株；20×20規(guī)格，畝用苗7000株。 種時注意：苗莖的弓背向畦溝，深不埋心，淺不露根。種后馬上淋透定根水。5天內(nèi)畦溝保持水深2/3，而且在7天內(nèi)每天早、晚各澆水一次。 （3）及時補苗：種后一周，已知苗是否成活，應(yīng)及時檢查補缺。 4、管理 4—①：種后一個月內(nèi)：種后一周苗成活，可看苗施速效肥，可促進花芽分化，以薄施勤施為原則。如20%人糞尿，或碳銨與過鈣（1∶2）混合后每公斤兌水50公斤撥澆，5天一次，保持土壤濕潤。出現(xiàn)老葉黃葉及時剝除。該階段保持有五葉一心較好。 草莓生長過程中及時除草，順便松土，有蚜蟲時及時防治。種后一個月，中耕松土一次，順便將起壟時未成梯形的地方修成梯形，并打孔施肥→硫酸鉀25公斤，鉀肥7.5公斤，尿素2.5公斤，過鈣25公斤。孔深15cm，孔位于兩植株之間。施肥后灌水一次，防病蟲害一次。 4—②蓋膜：開花前需蓋膜，在11月中旬，即種后1個月左右。在晴天，露干后進行。方法：兩個人將地膜蓋過畦面后拉直固定，再從兩邊地膜嵌入畦底固定，使面上平直，然后在苗心處撕開地膜，扯出苗，整理成原狀。自蓋膜開始，每周的畦溝灌水一次，并防治病蟲害一次，可噴一次10ppm的赤霉素促抽長。該階段同樣需摘病老葉，保留的葉數(shù)為六葉一心?？煽疵鐕娦┤~面肥。 4—③結(jié)果和采收：保留主花主果，摘除附屬花，一般每株留5~7個有效果即可。該期可噴0.3%磷酸二氫鉀3~4次，提高座果率。如果在開花盛期噴0.2%硫酸二氫鉀或0.3%的硼砂，也有一定增產(chǎn)作用，還可增加果的硬度。選在傍晚葉片潮濕時噴葉背為主。 收完第一批果，馬上施追肥。畝施復(fù)合肥15公斤，鉀肥15公斤，視苗情適加少量尿素和磷肥（打孔施），采果前以防治葉螨為主；采果中后期注意防治白粉病、灰霉病。在開花盛期盡量少噴藥。遇有霜凍可加蓋拱棚膜。 5、主要病蟲害 （1）葉斑?。喝~片上深紅色小圓斑，擴展到病斑周邊有明顯的紫紅色至灰棕色帶。及時摘病、老、黃葉。發(fā)病前用代森鋅合劑500倍，克菌丹水合劑500倍，70%甲托1000倍。 （2）灰霉病：莖、葉、果均會受害，先出現(xiàn)黃色小斑點，呈油漬狀后擴展至邊緣有褐色病斑，果實會變軟變爛，有灰色霉層?！?0%撲海因粉劑800倍、50%速克靈1000倍、百菌清600倍、甲托1000倍等均可用于防治?？稍诨ㄆ趪婌F，每周一次，連續(xù)2~3次。 （3）白粉?。喝~背出現(xiàn)薄霜狀白色的東西，擴至全株，葉卷湯成匙狀，花瓣變紅色，不開放；幼果感病則不再長大，著色不均?！嘌趸顾?000倍，三唑銅粉劑1500倍，15%硫磺合劑300~400倍。 （4）蚜蟲傳播病菌的主要媒介。敵敵畏、樂斯本、氧化樂果等可按說明書介紹使用。盛花期不宜用氧化樂果，會影響座果。 （5）葉螨類兩種：紅蜘蛛、銹蜘蛛。隱在葉背吸食葉片汁液。受害葉黃化卷曲，植株矮化。各時期會發(fā)生，應(yīng)從定植成活后開始防治。用藥：20%三氯殺螨楓、三氯殺螨醇600～1000倍，75%克螨特3000倍，殺螨丹600～800倍。 五、采收管理 果由綠色逐漸變白，最后成紅色并具光澤，即為成熟。最初先是見光面著色，隨后側(cè)面著色。果熟則軟化，并有香味。 一般開花30天后成熟采收。每批果采收期約3周。鮮食的在果面紅色占70%時可收，著色85%最有風(fēng)味。加工用的則在果充分熟后收，外運果則在果充分成熟前1～2天收。 因草莓成熟期不一致，最好能每天摘一次。最適采摘時間在露干至高溫之間或傍晚涼快時，否則易爛。采下的果帶有一小段果炳，不傷花萼。采摘后用塑料藍、小竹藍裝，再分級用紙盒，塑盒小包裝，后裝大木箱、紙箱，方便運輸。外運需冷藏車。 內(nèi)容出自廣西現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技示范園思** 我個人覺得不錯哦

標(biāo)簽：種植技術(shù)草莓